Микроскопияи флуоресцентӣ қобилияти мо дар визуализатсия ва омӯзиши намунаҳои биологиро тағир дод ва ба мо имкон дод, ки ба ҷаҳони мураккаби ҳуҷайраҳо ва молекулаҳо ворид шавем. Ҷузъи асосии микроскопияи флуоресцентӣ манбаи рӯшноӣ мебошад, ки барои ба ҳаяҷон овардани молекулаҳои флуоресцентӣ дар дохили намуна истифода мешавад. Дар тӯли солҳо, манбаъҳои гуногуни рӯшноӣ истифода мешуданд, ки ҳар кадоми онҳо хусусиятҳо ва бартариҳои беназири худро доранд.
1. Чароғи симоб
Лампаи симобии фишори баланд, ки аз 50 то 200 ватт аст, бо истифода аз шишаи кварц сохта шудааст ва шакли курашакл дорад. Дар дохили он миқдори муайяни симоб мавҷуд аст. Ҳангоми кор кардан дар байни ду электрод разряд ба амал меояд, ки симобро бухор мекунад ва фишори дохилӣ дар сфера зуд меафзояд. Ин раванд одатан тақрибан аз 5 то 15 дақиқа мегирад.
Партоби лампаи симобии баландфишор дар натиҷаи парокандашавӣ ва камшавии молекулаҳои симоб ҳангоми разряди электрод ба вуҷуд меояд, ки боиси паҳншавии фотонҳои нур мегардад.
Он нури пурқуввати ултрабунафш ва кабуд-бунафшро мебарорад, ки онро барои маводҳои гуногуни флуоресцентӣ ҳаяҷонбахш мувофиқ мекунад, бинобар ин онро дар микроскопияи флуоресцентӣ васеъ истифода мебаранд.
2. Чароғҳои ксенонӣ
Дигар манбаи нури сафед, ки дар микроскопияи флуоресцентӣ маъмулан истифода мешавад, лампаи ксенонӣ мебошад. Лампаҳои ксенонӣ, ба монанди лампаҳои симоб, спектри васеи дарозии мавҷҳоро аз ултрабунафш то наздик-инфрасурх таъмин мекунанд. Бо вуҷуди ин, онҳо аз рӯи спектрҳои ҳаяҷонбахши худ фарқ мекунанд.
Лампаҳои симоб партобҳои худро дар минтақаҳои наздики ултрабунафш, кабуд ва сабз мутамарказ мекунанд, ки тавлиди сигналҳои флуоресценти дурахшонро таъмин мекунад, аммо бо фототоксикагии қавӣ меояд. Аз ин рӯ, лампаҳои HBO одатан барои намунаҳои собит ё тасвири флуорессенси заиф нигоҳ дошта мешаванд. Баръакси ин, манбаъҳои чароғҳои ксенон дорои профили ҳамвортаре мебошанд, ки барои муқоисаи шиддат дар дарозии мавҷҳои гуногун имкон медиҳанд. Ин хусусият барои барномаҳое, ба монанди андозагирии консентратсияи ионҳои калсий муфид аст. Лампаҳои ксенонӣ инчунин дар диапазони наздики инфрасурх, бахусус тақрибан 800-1000 нм ҳаяҷони қавӣ доранд.
Чароғҳои XBO нисбат ба лампаҳои HBO бартариҳои зерин доранд:
① Шиддати якхелаи бештари спектр
② Шиддати спектри қавитар дар минтақаҳои инфрасурх ва миёнаи инфрасурх
③ Истеҳсоли бештари энергия, расидан ба диафрагмаи ҳадафро осонтар мекунад.
3. Светодиодҳо
Дар солҳои охир, дар соҳаи сарчашмаҳои нури микроскопияи флуоресцентӣ як рақиби нав пайдо шуд: LEDҳо. Светодиодҳо бартарии гузариши босуръати фурӯзон-хомӯшро дар миллисонияҳо, кам кардани вақти экспозитсияи намуна ва дароз кардани мӯҳлати намунаҳои нозукро пешниҳод мекунанд. Ғайр аз он, чароғҳои LED фано зуд ва дақиқ нишон медиҳанд, ки фототоксикатсияро ҳангоми таҷрибаҳои дарозмуддати ҳуҷайраҳои зинда ба таври назаррас коҳиш медиҳад.
Дар муқоиса бо манбаъҳои нури сафед, LEDҳо одатан дар доираи спектри ҳаяҷонангези тангтар мебароранд. Бо вуҷуди ин, бандҳои сершумори LED мавҷуданд, ки барои барномаҳои гуногунҷанбаи флуорессенсия имкон медиҳанд, ки LEDҳоро дар танзимоти микроскопияи муосири флуоресцентӣ интихоби бештар маъмул мекунанд.
4. Манбаи нури лазерӣ
Сарчашмаҳои нури лазерӣ хеле монохроматӣ ва самтнок мебошанд, ки онҳоро барои микроскопияи баландҳаҷм, аз ҷумла усулҳои баландсифат, ба монанди STED (Тамш шудани партовҳои ҳавасмандгардонӣ) ва PALM (Микроскопияи фотоактивии маҳаллӣ) беҳтарин мекунанд. Нури лазерӣ маъмулан барои мувофиқ кардани дарозии мавҷи мушаххаси ҳаяҷонбахш барои флюорофори мавриди ҳадаф интихоб карда мешавад, ки интихоби баланд ва дақиқро дар ҳаяҷонбахшии флуоресцентӣ таъмин мекунад.
Интихоби манбаи нури микроскопи флуоресцентӣ аз талаботи мушаххаси таҷрибавӣ ва хусусиятҳои намуна вобаста аст. Лутфан озодона дар тамос шавед, агар ба шумо ягон кӯмак лозим бошад
Вақти фиристодан: сентябр-13-2023